طرق التحليل الكيميائى لسوائل الجسم المختلفة
تنقسم طرق التحليل إلى قسمين (الكيفى - الكمى)
أولاً/ الكيفى:- وهو من الطرق البسيطة التى تكشف عن وجود المادة فقط دون تقدير حجمها مثل الكشف عن ( السكر -الزلال - الأجسام الكيتونية - هرمون الحمل "HCG" ) وهذه الإختبارات تتم على عينات البول.
ثانياً/ الكمى :- وفي هذه الطرق يتم تقدير و قياس نسب المواد المختلفة في الجسم بدقة متناهية من خلال أرقام ووحدات دولية متفق عليها.
طرق إجراء الإختبارات الكمية
1 - طريقة Colorimeter اللونية (spectro photomter) .
2 - طريقة الهجرة الكهربية Electrophoresis .
3 - طريقة Elisa .
4 - طريقة Flam photometer .
5 - طريقة العكارة .
6 - الكروماتوجرافي Chromatography .
7 - طريقة قياس النشاط الأشعاعي .
أولاً : في طريقة Colorimeter
يتم تحويل المادة المراد قياسها الى لون وذلك بخلطها بمادة أو عدة مواد أخرى , بحيث تتناسب درجة اللون وكثافته مع تركيز المادة التى نقوم بقياسها, فمثلا اذا زاد تركيز المادة يزيد تركيز اللون وكثافته والعكس. وتقاس درجة الون بواسطة جهاز قياس الألوان . ( وهناك قانون يمكن من خلاله الحصول على درجة تركيز المادة بواسطة ما يسمى بالمحلول القياسي "Standard Solution" )
س :- ما المقصود بالمحلول القياسي ؟
الجواب :- هو محلول معلوم التركيز محضربإزابة وزن معلوم من المادة المراد قياسها في حجم معلوم من الماء المقطر, لذلك هو يعطى قراءة ثابتة في كل مرة على جهاز قياس الألوان , وله دور أساسى فى عملية حساب تركيز الماة في العينة .
تركيب أجهزة القياس الضوئي
1 - مصدر الضوء (لمبات تنجستين مصدر للضوء العدى) - (لمبة هيدروجينية مصدر للأشعة فوق البنفسجية) .
2 - مرشحات ضوئية .
3 - منتقى موجة واحدة Monochromaton .
4 - منشور زجاجي أو عاكس مشتت للضوء .
5 - مكبر ضوئي Photomultiplier .
6 - خلية الأمتصاص (الكيوفيت) Cuvette .
7 - خلية ضوئية photo celle .
8 - نظام القراءة (يوجد طريقتان) :
أ - القراءة على تدريج ومؤشر الجهاز : وفي هذا النوع يوجد تدريجان انظام القراءة أحدهما يقراء النفاذية(Transmision) و الآخر للأمتصاص(Absorbance) و العلاقة عكسية بينهما .
ب - القراءة الرقمية Digital Reading : وتكون على عداد رقمي يتم ضبطه مسبقاً من خلال لوحة التحكم بالجهاز لتحديد نظام القراءة .
قوانين أمتصاص الضوء :-
أولاً / قانون لمبرت Lambert :- كمية الضوء الممتص يعتمد علىسمك المحلول الملون أو مسار الضوء خلال المحلول .
ثانياً / قانون بير Beer :- كمية الضوء الممتص تعتمد على لون المحلول .
وبدمج القانونين معاً - و في هذه الطريقة لابد من وجود (محلول قياسي) Standard Solution
يستعمل لضبط جهاز قياس الألوان محلول البلانك (Blank) وهذا المحلول يحتوى على كل المواد الداخلة في التفاعل عدا المادة المراد قياسها - كما يمكن أن يستخدم الماء المقطر كمحلول بلانك في بعض الأحيان .
س :- ما هي للأحتياطات الواجب مراعاتها عند إستخدام جهاز القياس الطيفي (الضوئي) ؟
1 - يجب تحديد طول الموجة (Wavelength) المخصص للقراءة .
2 - ضرورة ضبط (Zero) الجهاز على محلول البلانك (Blank) .
3 - مراعاة نظافة الكيوفيت Cuvette ووضعها في الجهاز بصورة صحيحة (بحيث يكون السهم الموجود على حافة الكيوفيت العلوية في مقابل وجة مستخدم الجهاز) .
4 - مراعات أن لا يقل المحلول في الكيوفيت عن الحد الأدنى للقراءة (1 مللتر) وعدم وجود أي فقعات بها .
5 - غلق مكان وضع الكيوفيت Cuvette عند القراءة .
6 - عمل قياسات جودة من آن لآخر Quality Control على الأجهزة والأدوات المستخدمة في المعامل .
يتبع....