تحليل الهرمونات بأستخدام جهاز mini vidas - طريقة عمل جهاز mini vidas - التفاعلات التي تجري داخل الجهاز
جهاز mini vidas من الاجهزة المتطورة والحديثة والتي تتميز بدقة النتائج وسرعة الاداء رغم ان هنالك اجهزة اكثر حداثة وهو جهاز ال vidas ولكن المعمول به الى الان بصورة مكثفة هو جهاز mini vidas
خطوات العمل :
1- يوضع المصل serum في شريط يسمى strip يحتوي هذا السترب على 10 حفر وهي كما يلي
1= sample well
2, 3, 4, 5 = empty wells
6= conjugate well
7, 8, 9 = wash buffer
10= substrate
.
المكون الثاني هو انبوب مخروطي صغير يعمل كماصة يسمى SPR
2- يحتوي الSPR على ال anti-antibody حيث يقوم بشفط المصل الموجود في الحفرة الاولى فيتفاعل الantigen الموجود في المصل مع ال antibody الموجود في الحفرة 6 المرتبط مع الانزيم
2- بالتأكيد ليس كل الجزيئات تتفاعل فيقوم ال spr بشفط محلول الغسل من احد الحفر ( 7، 8، 9 ) ويرجعه الى احد الحفر الفارغة ( 2، 3، 4 ، 5 ) من اجل ان يبقى ال antigen & antibody الملتصقان فقط في spr وهذه العملية تتكرر عدة مرات .اً
ويوجد لدينا في الحفرة السادسة
Antibody + conjugate enzyme
3- يتم التخلص من الكونجكيت غير المتفاعل بواسطة محلول الغسل بشفطه من احد الحفر ثم ارجاعه للحفر الفارغة
4- يوجد في الحفرة الاخيرة مادة مفلورة
Fluorescence substrate
5- الان لدينا في ال spr انتجين متفاعل مع انزيم مرتبط بأنتي بدي
ولدينا في الحفرة الاخيرة مادة مفلورة .
6- تتفاعل مكونات الspr مع المادة المفلورة حيث يبقى في خلية القياس فقط الانزيم المرتلط بالsubstrate ثم يسلط flash lamp
وبحسب نظرية الضوء المفسفر تأخذ هذه الجزيئات طاقة 370 وتبعث طاقة 450 يسجلها الجهاز على شكل نتائج للتحاليل وهنا ينتهي التحليل. ..
ملاحظات :
1- يحتوي محلول الغسل وكذلك الكونجكيت على عوامل مساعدة اخرى تدخل وتخرج من التفاعل بلا تأثير ولكنها مساعدة في الارتباطات والتفاعلات .
2-كلما كان الانتجين في السيروم عالي يستهلك كونجكيت أكثر مع الانزيم المرتبط به .
3- ال substrate هي عبارة عن
4methylumbelliferylphosphate
4- الانزيم هو غالباً ALP الكلاين فوسفتيز
5-كلما كان الانزيم المستخدم كبير كلما كان ال Substrate المستهلك اكثر
#
لا تنسوني بالدعاء
اخوكم أزهر العامري
رد مع اقتباس
